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2.2. Immunohistochemical Staining. 2.4. Experimental Scoring System. Quantitative ER score = 1/20 * (percent of ER-positive cancer cell nuclei + (average nuclear intensity × 100)). Both the semi-quantitative and quantitative analyses of the 66 cases of ILC considered in our study included the determination of the following three parameters: Percent of ER-positive cells, average nuclear coloration intensity, and quantitative ER score. In the semi-quantitative, classical approach, the first two parameters were evaluated by at least two experienced pathologists and were based on their subjective treatment of the coloration intensity (which attained integer values, 0–3), while the percentage of the ER-positive nuclei was assessed by manual counting and was scored typified according to the Allred ranges ( Figure 3 ). The proposed quantitative approach in this work included both the counting and coloration intensity evaluation by a software that utilized a deconvoluted color intensity and a counting grid.

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